pcr实验室用的隔墙板

pcr实验室用的隔墙板
1、主体结构:
目前实验室的主体多为彩钢板、铝合金型材。室内所有阴角、阳角均采用铝合金R50内圆角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。并且彩钢板结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好。
2、标准的四区分隔和气压调节:
将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增区及产物分析检测区四个独立的实验区。整个区域有一个整体缓冲走廊。每个独立实验区设置有缓冲区,同时各区通过气压调节,使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。
3、消毒:
在四个实验区和四个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。
在试剂准备区和标本制备区还设置移动紫外线灯,对实验桌进行局部消毒。
4、机械连锁不锈钢传递窗:
试剂和标本通过机械连锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染(人物分流)。
5、地面
地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好。便于进行清扫,耐腐蚀。没有条件的也可采用水磨石地面,或大块的瓷砖(至少800mm×800mm)接缝需要小于2mm。
6、照明
灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点。
另外:
PCR实验室可分为两个大的功能工作区域:核酸扩增前区和核酸扩增后区。核算扩增前区包括试剂准备间和样本制备间,这个两房间各自独立,不能出现空气互通,这两个房间相对外界气压呈正压状态。核酸扩增后区包括扩增区和产物分析区,使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室,这个两区域可以合并为一个房间。这个区域如果是分开两个房间,这两个房间也必须是各自独立,不能出现空气互通。核算扩增后区对外界气压呈负压状态。
‚PCR实验室根据使用仪器的功能合理设置各个工作区域,如采用聚合酶联反应:则设置试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区四个单独的工作区域,这是最常用的分区方式。样品需要粉碎处理的,还需增设样品粉碎区;若使用实时荧光PCR法:基因扩增区、基因产物分析区可以合并在一个房间内;采用标本处理、核酸提取及扩增检测为一体的全自动化PCR分析仪,则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并为一个区域,因此PCR实验室原则上设置五个区或四个区或三个区或二个单独的工作区。
ƒ核酸扩增前区和核酸扩增后区可设在一个房间内,但必须在满足下列要求的前提下:
核酸扩增前区实验室内设置两个不同位置的实验区,试剂配置在超净工作台中操作,样品处理在生物安全柜内操作。
在核酸扩增后区使用全封闭的扩增和检测系统,如实时荧光PCR仪等。
每个实验人员使用各自的试剂、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。
在实验前后对操作区域和共享器具进行清洁及消毒。
各区域的试剂、器具、仪器和设备为该区专用,不得交叉使用。
三、空气流与压差要求
PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行,防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。风速流向不得混乱。
为了保证房间内的压差和避免污染,应在空调面板处写清楚送风机和排风机的开启顺序和关闭顺序,先后顺序不得混乱。
空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5帕,洁净室(区)与室外大气的静压差应大于10帕,应配备监测静压差的设备,并定期监控。
一般情况下,试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染;可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。
核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。

在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。 PCR实验室进风由原有中央空调控制的要求将中央空调风口安装到指定定点。
四、实验室面积及设备间距
一般来说各房间的面积没有严格要求,只需能放置所需仪器设备,并且便于人员操作即可,但是有生物安全柜的房间面积不能小于10平米,并且每增加一台生物安全柜,房间就要增加10平米。
各实验室缓冲间的面积一般为1300*(1300或1500)mm为宜,并且缓冲间的面积不能大于实验室房间面积的1/8。
在做平面设计的时候,首先要考虑的因素是就是“安全”,实验室是最易发生爆炸、火灾、毒气泄露等的场所。我们在做平面设计的时候,应尽量地要保持实验室的通风流畅、逃生通道畅通。根据国际人体工程学的标准。我们做如下的划分以供参照:
实验台与实验台通道划分标准(通道间隔用L表示)
L>500mm时,一边可站人操作;
L>800mm时,一边可坐人操作;
L>1200mm时,一边可坐人,一边可站人,中间不可过人;
L>1500mm时,两边可坐人,中间可过人;
L>1800mm时,两边可坐人,中间可过人可过仪器

天平台、仪器台不宜离墙太近,离墙400mm为宜。为了在工作发生危险时易于疏散,实验台间的过道应全部通向走廊。另:实验室建筑层高宜为3.7米-4.0米为宜,净高宜为2.7米-2.8米,有洁净度、压力梯度、恒温恒湿等特殊要求的实验室净高宜为2.5米-2.7米(不包括吊顶);实验室走廊净宽宜为2.5米-3.0米.普通实验室双门宽以1.1米-1.5米(不对称对开门)为宜,单门宽以0.8米-0.9米为宜。
五、洁净装修要求
洁净室(区)的内表面应平整光滑、无裂缝、接口严密、无颗粒物脱落,并能耐受清洗和消毒,墙壁与地面的交界处宜成弧形或采取其他措施,以减少灰尘积聚和便于清洁。
洁净室(区)内各种管道、灯具、风口以及其他公用设施,在设计和安装时应考虑使用中避免出现不易清洁的部位。
洁净室(区)的窗户、天棚及进入室内的管道、风口、灯具与墙壁或天棚的连接部位均应密封。
六、工作服要求
在净化车间内工作的人员应穿着符合要求的工作服。工作服的选材、式样及穿戴方式应与生产操作和空气洁净度级别要求相适应,并不得混用。洁净工作服的质地应光滑、不产生静电、不脱落纤维和颗粒性物质。无菌工作服必须包盖全部毛发、胡须及脚部,并能阻留人体脱落物。不同空气洁净度级别使用的工作服应当分别清洗、整理,必要时消毒或灭菌。工作服洗涤、灭菌时不应带入附加的颗粒物质。工作服应制定清洗周期。
进入各个区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开时,不得将工作服带出。
实验室应建立、执行人员进出洁净区的清洁程序和管理制度,人员清洁程序合理。
七、人流路径与物流路径
进入实验室区域工作人员应该按照以下路径:
公共清洁区——更衣间(更换洁净服)——缓冲间——污染实验区
工作人员退出实验室的路径为:
污染试验区——缓冲间——淋浴间(有条件的可设置)——更衣间——公共清洁区
所有的物品进入实验区必须经过双扉互锁传递窗,利用传递窗消毒后才可进入,实验室内所有物品的也必须经过传递窗才可以传递到实验室以外的清洁公共区。
八、门的开启方向
实验室建筑层高宜为3.7米-4.0米为宜,PCR实验室净高宜为2.5米-2.7米(不包括吊顶);实验室走廊净宽宜为2.5米-3.0米.普通实验室双门宽以1.1米-1.5米(不对称对开门)为宜,单门宽以0.8米-0.9米为宜。
一般实验室门主要向里开,但如有危险的房间,房门应朝外开,房门材质**选择压力玻璃。
有压差梯度的房间,门的开启方向应朝向正压方向一侧开启;
考虑到消防安全,对于那些主要逃生门的开启方向应朝向清洁区方向开启。
九、基本仪器设备考虑
(1)试剂贮存和准备区
该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。对与气流压力的控制,本区应对外界保持微正压。
试剂准备区仪器设备主要应有加样器、冰箱、天平、低速离心机、混匀器、可移动紫外灯等。可使用超净工作台作为试剂配制操作台面。
(2)标本制备区
该区域主要进行的操作为样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。
标本制备区仪器设备主要应有生物安全柜(**为B2,可避免提取核酸在柜内反复循环,造成标本间交叉“污染”,出现假阳性结果。此外还应配备加样器、台式高速离心机(冷冻及常温)、台式低速离心机、恒温设备(水浴和/或干浴仪)、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。
(3)扩增和扩增产物分析区
该区域主要进行的操作为DNA扩增和扩增片段的测定。此外,已制备的DNA模板(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。
扩增区主要仪器就是核酸扩增热循环仪(PCR仪,实时荧光或普通的)。热循环仪的电源应专用,并配备一个稳压电源或UPS,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响。此外,根据工作需要,还可配备加样器、超净台等。

产物分析区:本区所使用的仪器设备可能有加样器、电泳仪(槽)、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、酶标仪和洗板机等。

基因扩增实验室缓冲间要有什么设施
1、主体结构:
目前实验室主体彩钢板、铝合金型材室内所阴角、阳角均采用铝合金R50内圆角铝解决容易污染、积尘、易清扫等问题并且彩钢板结构牢固线条简明美观密封性
2、标准四区隔气压调节:
PCR程试剂准备、标本制备PCR扩增区及产物析检测区四独立实验区整区域整体缓冲走廊每独立实验区设置缓冲区同各区通气压调节使整PCR实验程试剂标本免受气溶胶污染并降低扩增产物员环境污染
3、消毒:
四实验区四缓冲区顶部及传送窗内部安装紫外灯供消毒用
试剂准备区标本制备区设置移紫外线灯实验桌进行局部消毒
4、机械连锁锈钢传递窗:
试剂标本通机械连锁锈钢(建议使用电连锁式)传递窗传递保证试剂标本传递程受污染(物流)
5、面
面建议使用PVC卷材面或自流坪面整体性便于进行清扫耐腐蚀没条件采用水磨石面或块瓷砖(至少800mm×800mm)接缝需要于2mm
6、照明
灯具要选用净化灯具能达便于清洗、积尘特点
另外:
?PCR实验室两功能工作区域:核酸扩增前区核酸扩增区核算扩增前区包括试剂准备间本制备间两房间各自独立能现空气互通两房间相外界气压呈压状态核酸扩增区包括扩增区产物析区使用实荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪PCR实验室两区域合并房间区域两房间两房间必须各自独立能现空气互通核算扩增区外界气压呈负压状态
?PCR实验室根据使用仪器功能合理设置各工作区域采用聚合酶联反应:则设置试剂储存准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物析区四单独工作区域用区式品需要粉碎处理需增设品粉碎区;若使用实荧光PCR:基扩增区、基产物析区合并房间内;采用标本处理、核酸提取及扩增检测体全自化PCR析仪则标本制备区、扩增区、扩增产物析区合并区域PCR实验室原则设置五区或四区或三区或二单独工作区
?核酸扩增前区核酸扩增区设房间内必须满足列要求前提:
核酸扩增前区实验室内设置两同位置实验区试剂配置超净工作台操作品处理物安全柜内操作
核酸扩增区使用全封闭扩增检测系统实荧光PCR仪等
每实验员使用各自试剂、耗材、移液器盛放污染物盛器
实验前操作区域共享器具进行清洁及消毒
各区域试剂、器具、仪器设备该区专用交叉使用
三、空气流与压差要求
PCR实验室空气流向必须严格按照试剂储存准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物析区空气压力逐渐递减式进行防止扩增产物顺空气气流进入扩增前区域风速流向混乱
保证房间内压差避免污染应空调面板处写清楚送风机排风机启顺序关闭顺序先顺序混乱
空气洁净级别同相邻房间间静压差应于5帕洁净室(区)与室外气静压差应于10帕应配备监测静压差设备并定期监控
般情况试剂配制室及品处理室宜呈微压防外界含核酸气溶胶空气进入造污染;通控制进风风量于排风风量达压效
核酸扩增室及产物析室应呈微负压防含核酸气溶胶扩散污染试剂与品通控制排风风量于进风风量达负压效

理想情况PCR实验室缓冲间内设置压使室内空气流向室外室外空气流向室内 PCR实验室进风由原央空调控制要求央空调风口安装指定定点
四、实验室面积及设备间距
般说各房间面积没严格要求需能放置所需仪器设备并且便于员操作即物安全柜房间面积能于10平米并且每增加台物安全柜房间要增加10平米
各实验室缓冲间面积般1300*(1300或1500)mm宜并且缓冲间面积能于实验室房间面积1/8
做平面设计候首先要考虑素安全实验室易发爆炸、火灾、毒气泄露等场所我做平面设计候应尽量要保持实验室通风流畅、逃通道畅通根据际体工程标准我做划供参照:
实验台与实验台通道划标准(通道间隔用L表示)
L>500mm边站操作;
L>800mm边坐操作;
L>1200mm边坐边站间;
L>1500mm两边坐间;
L>1800mm两边坐间仪器

平台、仪器台宜离墙太近离墙400mm宜工作发危险易于疏散实验台间道应全部通向走廊另:实验室建筑层高宜3.7米-4.0米宜净高宜2.7米-2.8米洁净度、压力梯度、恒温恒湿等特殊要求实验室净高宜2.5米-2.7米(包括吊顶);实验室走廊净宽宜2.5米-3.0米.普通实验室双门宽1.1米-1.5米(称门)宜,单门宽0.8米-0.9米宜
五、洁净装修要求
洁净室(区)内表面应平整光滑、裂缝、接口严密、颗粒物脱落并能耐受清洗消毒墙壁与面交界处宜弧形或采取其措施减少灰尘积聚便于清洁
洁净室(区)内各种管道、灯具、风口及其公用设施设计安装应考虑使用避免现易清洁部位
洁净室(区)窗户、棚及进入室内管道、风口、灯具与墙壁或棚连接部位均应密封
六、工作服要求
净化车间内工作员应穿着符合要求工作服工作服选材、式及穿戴式应与产操作空气洁净度级别要求相适应并混用洁净工作服质应光滑、产静电、脱落纤维颗粒性物质菌工作服必须包盖全部毛发、胡须及脚部并能阻留体脱落物同空气洁净度级别使用工作服应别清洗、整理必要消毒或灭菌工作服洗涤、灭菌应带入附加颗粒物质工作服应制定清洗周期
进入各区域必须严格按照单向进行同工作区域使用同工作服(例同颜色)工作员离工作服带
实验室应建立、执行员进洁净区清洁程序管理制度员清洁程序合理
七、流路径与物流路径
进入实验室区域工作员应该按照路径:
公共清洁区——更衣间(更换洁净服)——缓冲间——污染实验区
工作员退实验室路径:
污染试验区——缓冲间——淋浴间(条件设置)——更衣间——公共清洁区
所物品进入实验区必须经双扉互锁传递窗利用传递窗消毒才进入实验室内所物品必须经传递窗才传递实验室外清洁公共区
八、门启向
实验室建筑层高宜3.7米-4.0米宜PCR实验室净高宜2.5米-2.7米(包括吊顶);实验室走廊净宽宜2.5米-3.0米.普通实验室双门宽1.1米-1.5米(称门)宜,单门宽0.8米-0.9米宜
般实验室门主要向危险房间房门应朝外房门材质选择压力玻璃
压差梯度房间门启向应朝向压向侧启;
考虑消防安全于些主要逃门启向应朝向清洁区向启
九、基本仪器设备考虑
(1)试剂贮存准备区
该实验区主要进行操作贮存试剂制备、试剂装主反应混合液制备试剂用于品制作材料应直接运送至该区经其区域试剂原材料必须贮存本区内并本区内制备所需贮存试剂与气流压力控制本区应外界保持微压
试剂准备区仪器设备主要应加器、冰箱、平、低速离机、混匀器、移紫外灯等使用超净工作台作试剂配制操作台面
(2)标本制备区
该区域主要进行操作本保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管测定DNA合本区压力梯度要求:相于邻近区域压避免邻近区进入本区气溶胶污染另外由于加操作能发气溶胶所致污染所应避免本区内必要走
标本制备区仪器设备主要应物安全柜(B2避免提取核酸柜内反复循环造标本间交叉污染现假阳性结外应配备加器、台式高速离机(冷冻及温)、台式低速离机、恒温设备(水浴/或干浴仪)、冰箱、混匀器移紫外灯等
(3)扩增扩增产物析区
该区域主要进行操作DNA扩增扩增片段测定外已制备DNA模板(自本制备区)加入主反应混合液(自试剂贮存制备区)制备反应混合液等本区内进行本区压力梯度要求:相于邻近区域负压避免气溶胶本区漏避免气溶胶所致污染应尽量减少本区内必要走别操作加等应超净台内进行
扩增区主要仪器核酸扩增热循环仪(PCR仪实荧光或普通)热循环仪电源应专用并配备稳压电源或UPS防止由于电压波扩增测定影响外根据工作需要配备加器、超净台等

产物析区:本区所使用仪器设备能加器、电泳仪(槽)、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、酶标仪洗板机等

我在分子生物学实验室经常做PCR/qPCR实验,请问有可拆分的96孔PCR反应板吗?这样我就可以节省不少费用了

北京中生提供英国产的break-A-Way,96孔可拆分PCR反应板、8个可拆分的微孔组成一孔条,12个孔条组成一块板。不是广告哦,网上搜的。

如何建立实验室?检测实验室怎么建设?

第三方检测实验室建设要求:

1、场所要求:

实验室建设项目不得有干扰,配置专用的无菌室、样品室、天平室、纯水制备间、样品处理室、固体样品制备间、办公室等。

2、通风空调系统

实验室整栋大楼可配置中央空调系统,中央空调系统可进行分区,分时段的模块管理。中央管道布局应根据实验室通排风管道的设计,避免施工交错重叠。

3、供气系统

供气系统的安全很重要,有条件的可配置独立的气瓶间,1是设置泄露报警、紧急切断和强排风等装置;2是为保证气压的稳定性,需进行多级减压供气,设置气路吹扫、排空等。

4、电气系统

电气分为2个方面,分别是强电和弱点:

强电:

根据功能间、楼层、整栋大楼统计,每个独立的仪器间配备房间终端配电箱,不得与其他插座串联;

配备UPS(不间断电源),根据实验室设备用电参数,确定不间断电源功率及电流参数;

地面电插具有一定程度的防水,电插位置应靠近所供电仪器,减少地面走线。

弱电:

配备多个网络通讯端口和电话接口,在主要通道上安装监控等方便管理。

5、实验室家具

配备实验室家具,例如实验边台、实验中央台、高柜、吊柜等常备的家具,实验室家具要符合人体工学,具有耐腐蚀耐酸碱等特点,可根据实际的采购需求,选择材质、数量、颜色等参数。

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